Резистентность и период гибели микроорганизмов- индикаторов эффективности стерилизации.

Время гибе­ли микроорганизмов-индикаторов, в принципе, должно быть примерно таким же, как и период действия ле­тального фактора, необходимый собственно для стери­лизации. Поэтому при приготовлении биологических индикаторов постоянно возникает вопрос, каковы про­должительность воздействия, которую выдерживает ин­дикатор, и его интенсивность.

Вид микроорганизма. Скорость, с какой уменьшается количество способных к размножению мик­роорганизмов популяции под действием стерилизующе­го агента, зависит от вида микроорганизма, поэтому различают чувствительные и нечувствительные к данно­му стерилизующему агенту виды и штаммы. Корреля­ция устойчивости к различным агентам отсутствует. Микроорганизм, резистентный к пару под давлением, может быть чувствительным к горячему воздуху, а чув­ствительный к нагреванию может быть резистентным к гамма-лучам.

Состояние микроорганизмов. Известно, что бактериальные споры более резистентны, чем веге­тативные клетки. Однако это правило недействительно для стерилизации облучением и, очевидно, для стерили­зации окисью этилена. Устойчивость зависит также от условий, в которых получены микроорганизмы, т. е. от состава питательной среды, температуры культивирова­ния, интенсивности аэрации и перемешивания, наличия ингибиторов роста, микроэлементов и др.

Количество микроорганизмов. Чем боль­ше микроорганизмов на стерилизуемом объекте, тем длительнее период стерилизации до достижения мини­мально допустимой концентрации микроорганизмов. Этот вопрос рассматривался в разделе 3.

Внешние факторы. Эффективность действия бактерицидного агента значительно снижается под влия- 211

ниєм субстанций, которые окружают микроорганизмы: пленки ПАВ и белковых веществ, комки и др.

Перечисленные факторы определяют так называе­мую резистентность популяции. Продолжительность экспонирования, необходимая для преодоления их дей­ствия, может экспериментально определяться на харак­терных пробах «естественно» контаминированного ма­териала. Она зависит от концентрации микроорганиз­мов в сыром материале, метода приготовления, асепти­ки техники приготовления и подготовки продукта к сте­рилизации (очистка).

Продолжительность действия, необходимую для сте­рилизации продукта и определяемую при контроле на ■ стерильность, на практике часто увеличивают.

Крутизна кривой выживаемости. Чем бо­лее пологая кривая выживаемости, тем медленнее сни­жается количество микроорганизмов в ходе стерилиза­ции и тем позже достигается их минимально допусти­мая концентрация.

Вид, цель применения и значение объ­ект а. Если не исключена возможность дальнейшего ро­ста выживших микроорганизмов на (или в) стерилизуе­мом объекте, то интервал надежности должен быть во­обще больше, чем в случаях, когда количество выжив­ших микроорганизмов не может увеличиваться (инстру­менты, приборы). Большое значение имеют условия хранения (температура, продолжительность). Следует учитывать гарантируемую эффективность стерилизации продукта. В зависимости от назначения объекта неко­торые виды микроорганизмов иногда можно не учи­тывать.

Экономичность метода. Часто, когда практи­чески можно было бы выбрать любую интенсивность стерилизации, в целях экономии от этого отказываются. Это относится, например, к стерилизации питательных сред в производстве дрожжей и бутанола. Расходы, счи­тающиеся необходимыми, в зависимости от обстоя- 212

тельств должны быть оправданы экономикой произ­водства.

Интервал надежности должен быть тем больше, чем неравномернее контаминирован стерилизуемый матери­ал. Для определения необходимой продолжительности воздействия при различных методах и задачах упомя­нутые параметры имеют различное значение. В целом интервал надежности должен быть как можно больше. При разнообразии методов и задач не следует рассчи­тывать на то, что для всех целей будет приемлемым единственный тип индикатора. Это предполагает необ­ходимость точного знания области применения индика­тора и поддержания условий, положенных в основу из­мерения. Требуется, в частности, обращать внимание на состояние продукта перед стерилизацией и соответству­ющим образом контролировать сохранение условий, при­емлемых для измерения.