Чистые культуры микроорганизмов в качестве индикаторов эффективности стерилизации.
Отмечается [155], что наряду с естественными популяциями применяют микробиологические индикаторы стерилизации, которые готовят с помощью чистых культур. Это высушенные на фильтровальной бумаге, волокне, стекле, песке или алюминиевой фольге бактериальные суспензии, частично в комбинации с лиофилизированной или готовой к употреблению питательной средой, а также с химическим индикатором.
Последний в определенных условиях должен показывать, действовал ли бактерицидный агент на тест-объект. В других случаях химический индикатор должен облегчать оценку контроля стерильности микробиологических индикаторов; изменяя цвет, он выявляет рост выживших микроорганизмов на питательной среде. Иногда в качестве биологического индикатора рекомендуют использовать споры, суспендированные непосредственно в культуральной жидкости. Однако следует подчеркнуть, что несмотря на многообразие различных форм индикаторов, ни один из них в полной мере не отвечает всем требованиям.Чистые культуры имеют то преимущество, что можно более или менее активно регулировать резистентность тест-объектов путем изменения условий культивирования и приготовления. Знание внешних факторов, от которых зависит резистентность микроорганизма, прино- 213 сит, таким образом, двойную пользу: дает возможность, с одной стороны, исключить или перевести в менее резистентное состояние высокорезистентные формы, а с другой, приготовить тест-объекты с необходимой резистентностью. В принципе, можно приготовить очень много вариантов индикаторов за счет варьирования состояния и свойств бактерионосителя, суспендирующей среды, степени высушивания и др. Однако во всех случаях исключительную роль в обнаружении оставшихся жизнеспособных клеток микроорганизмов-индикаторов играют состав и свойства индикаторной питательной среды.
Чистые культуры позволяют определять количественные характеристики эффективности режимов стерилизации путем подсчета оставшихся жизнеспособных микроорганизмов.
При этом построенная на основании результатов специальных опытов кривая выживаемости может выполнять функцию калибровочной кривой. Из отношения исходного количества микроорганизмов к количеству выживших к определенному моменту времени можно определять эффективность метода.Имеющийся опыт показывает, что для изготовления биологических индикаторов следует применять микроорганизмы, легко обнаруживаемые обычными микробиологическими методами. С этой точки зрения анаэробные микроорганизмы, по-видимому, менее пригодны, чем аэробные, а из последних предпочтение следует отдать тем, которые могут расти на простых субстратах. При выборе штамма необходимо обращать особое внимание на сохранение постоянства терморезистентности как от партии к партии, так и во время хранения. Чистые культуры почти всегда не удовлетворяют этому требованию. Бактериальный штамм должен легко идентифицироваться и отличаться каким-либо типичным признаком от микроорганизмов, обычно появляющихся в научно-исследовательской лаборатории в качестве контаминантов.
Сравнение накопленных экспериментальных данных показывает, что у микроорганизмов отсутствует корреляция между относительной резистентностью к горячему воздуху, пару под давлением, ионизирующему облучению и к окиси этилена. Поэтому чистые культуры имеют недостаток, исключающий возможность приме- 214
нения одного и того же штамма для различных бактерицидных агентов.