Методы лабораторной диагностики гельминтозов

Все методы лабораторной диагностики гельминтозов можно разделить на паразитологические и иммунологические (табл. 7) и представить в виде схемы (стр. 109).

Паразитологические методы основаны на обнаружении половозрелых особей гельминтов или их фрагментов (гельминтоскопия), яиц (овоскопия) или личинок (лярвоскопия).

Выбор материала зависит от локализации паразита. Исследуют фекалии, мокроту, желчь, мышечную ткань, кровь и др. Большинство гельминтов паразитируют в пищеварительной системе (кишечнике, желчевыделительной системе), поэтому чаще исследуют фекалии.

Паразитологические методы классифицируют на макроскопические (исследование материала невооруженным глазом) и микроскопические (с помощью микроскопа).

Гельминтоскопия относится к макроскопическим методам, а овоскопия и лярвоскопия — к микроскопическим.

Метод гельминтоскопии (макроскопический) — это метод отстаивания. Фекалии несколько раз заливают водой, размешивают и отстаивают. Надосадочную жидкость сливают. Осадок исследуют. В нем обнаруживают гельминтов и их фрагменты (ско- лексы, проглоттиды). Метод используют для проверки результатов лечения тениоза, тениаринхоза, дифиллоботриоза.

Методы овоскопии — это нативный мазок и его модификации и методы обогащения — концентрация яиц путем всплывания (флотации) или осаждения (седиментации).

Нативный мазок: готовят временный препарат фекалий (мазок фекалий) на предметном стекле в 2-3 каплях глицерина. Под микроскопом обнаруживают яйца. Для диагностики исследуют не менее 4 препаратов. Модификация метода нативного мазка — толстый мазок по Като. Кусочек фекалий наносят на предметное стекло и накрывают вместо покровного стекла целлофаном. Целлофан предварительно обрабатывают в смеси фенола, глицерина и красителя малахитового зеленого. Яйца гельминтов окрашиваются в зеленый цвет. Этот метод более практичный и эффективный, чем нативный мазок.

Методы флотации (всплывания) основаны на концентрации яиц в поверхностном слое насыщенного раствора соли. Фекалии размешивают в растворе соли с большой плотностью. Яйца гельминтов легче раствора, поэтому они всплывают и накапли-

ваются в поверхностной пленке. Поверхностную пленку переносят на предметное стекло и микроскопируют.

К методам флотации относятся методы Фюллеборна и Калан- тарян. По методу Фюллеборна используют насыщенный раствор поваренной соли (NaCl), а по методу Калантарян — раствор нитрата натрия (NaNO3).

Метод осаждения (метод Красильникова) — фекалии размешивают в насыщенном растворе стирального порошка, центрифугируют, надосадочную жидкость сливают. Тяжелые яйца концентрируются в осадке. Осадок исследуют под микроскопом.

Специальные методы для диагностики тениаринхоза и энтеробиоза — это соскоб с перианальных складок и метод липкой ленты (метод Грэхема).

Соскоб с перианальных складок делают ватным тампоном или заточенной спичкой. С перианальных складок снимают яйца гельминтов, готовят препарат и микроскопируют.

Метод липкой ленты (метод Грэхема). Кусок липкой ленты (скотч) приклеивают к коже в области ануса. Затем ленту наклеивают на предметное стекло и микроскопируют.

Методы лярвоскопии — обнаружение личинок. Основаны часто на способности личинок двигаться по направлению к свету и теплу. Примеры лярвоскопии: биопсия мышц и обнаружение личинок трихинелл, культивирование фекалий для диагностики анкилостомоза и некатороза, обнаружение личинок филярий в мазке крови.

Диагностика трихинеллеза: проводят биопсию мышц, готовят гистологический препарат и микроскопируют. Обнаруживают личинки трихинеллы.

Диагностика анкилостомоза и некатороза: культивируют фекалии на фильтровальной бумаге (метод Харада и Мори). На фильтровальную бумагу намазывают фекалии. Бумагу опускают в пробирку с водой и ставят в термостат. Через 5-7 дн из яиц образуются филяриевидные личинки. Работают в резиновых перчатках, так как личинки — инвазионная стадия и человек может заразиться.

Диагностика филяриозов: исследуют мазки крови. Обнаруживают микрофилярии.

Иммунологические методы используют в тех случаях, когда гельминт локализуется во внутренних органах и не выводится во внешнюю среду. К ним относятся внутрикожная аллергическая проба и серологические реакции.

Внутрикожная аллергическая проба применяется для диагностики эхинококкоза, альвеококкоза и трихинеллеза. Например, внутрикожно вводят препарат из жидкости эхинококкового пузыря. У больных появляются отек и покраснение на коже.

Серологические реакции основаны на определении антител к паразитам в сыворотке крови больных. Их используют для диагностики шистосомозов, цистицеркоза, эхинококкоза, альвеококко- за, трихинеллеза и др.