Исследование рыб для обнаружения метацеркариев эхинохазму- ca (Echinochasmus perfoliatus).
Эхинохазмус — паразит плотоядных, свиней, птиц и человека. Локализуется в тонком кишечнике. Регистрируется в Нижнем Поволжье. Вторые промежуточные хозяева — щука, сазан, линь, плотва, вобла, тарань, лещ, судак, белоглазка, ерш, красноперка, уклея, жерех, густера, чехонь, вьюн, сом.
Локализация метацеркариев — в жабрах. Извлеченные жабры молодых рыб (сеголетков) микроскопируют в целом виде (компрессорный метод). От крупных рыб ножницами отрезают жаберные листочки вдоль латерального сосуда, переносят препаровальной иглой на большое предметное стекло и исследуют компрессорным методом.Личинки заключены в цисты округлой формы, размером 0,047— 0,110x0,041—0,098 мм. Оболочка цисты прозрачная, эластичная, толщина ее 0,002—0,003 мм. Диаметр ротовой и брюшной присосок 0,0258—0,03 мм. У метацеркариев овальной формы ротовая присоска окружена адоральным диском, на котором имеются 24 прозрачных крючка. Метацеркарии округлой формы чіще всего лишены адорального диска и крючков. Выражены короткий префа- ринкс, шаровидный фаринкс, короткий пищевод, имеющий две кишечные трубки (разветвление над брюшной присоской), две экскреторные полости, дорсальнее брюшной присоски они соединяются B общий экскреторный проток, который продолжается узким извилистым экскреторным пузырем. Справа и слева от брюшной присоски имеется цесколько блестящих округлых образований. B задней части тела заметны зачатки двух семенников и яичника.
Исследование пресноводных и морских рыб на зараженность пле- роцеркондами цестод семейства дифиллоботриид (Diphyllobothriidae). Инвазионные личинки в рыбах (плероцеркоиды) от разных видов морфологически сходны, обнаруживаются свободными от цист и в цистах.Длявыявленияплероцеркоидов широкого ленте- ца исследуют щук и налимов по 15, окуней и ершей — по 30 экземпляров разной массы, желательно более массивных, так как в крупной р.ыбе больше вероятность обнаружения плероцеркоидов.
Локализуются личинки в полости тела, на стенках желудка, кишечника, в икре, молоках, печени, поджелудочной железе, кишечном жире, мышцах.У щуки и окуня разного возраста локализация плероцеркоидов неодинаковая: у молодых, мелких рыб личинки находятся в основном в мускулатуре, а у крупных, взрослых мускулатура меньше заселяется плероцеркоидами.
B очагах с напряженной инвазией выявлено более интенсивное заселение мышц рыб плероцеркоидами, чем в очагах со слабой. Плероцеркоиды широкого лентеца в щуках и налимах располагаются во внутренних органах и мускулатуре, у окуней и ершей — почти всегда в мышцах.
Плероцеркоиды широкого лентеца — небольшие удлиненные личинки молочного или беловатого цвета, заметны невооруженным глазом. Длина их от нескольких миллиметров до 1—2,5 см, ширина — до 2—3 мм; подвижны. Внешне они имеют вид стерженька червеобразно-булавовидной формы. Головной конец более широкий, хвостовой — утонченный. Под микроскопом заметны на головном конце две щели (ботрии). Поскольку живые плероцеркоиды подвижны и способны сокращаться, то их величина и форма постоянно меняются. Наибольшую активность личинки приобретают тогда, когда их помещают в теплый физиологический раствор.
Исследование начинают с внешнего осмотра рыб. Если на поверхности тела через кожу просвечивают беловатые удлиненные или крупные образования, то их осторожно выделяют и исследуют в свежем виде. Затем разрезают ножницами или скальпелем стенку тела по средней линии брюшка от клоаки до области сердца. Делают перпендикулярный срез по левой стороне, чтобы открыть дос
туп к полости тела. Осматривают плевру, печень, на поверхности которых часто обнаруживают плероцеркоидов, затем сердце, стенки желудка и кишечника, брыжейку, селезенку, половые органы, почки, жировые отложения. Органы отделяют, помещают в кювету или на большое стекло. Их разрезают и тщательно просматривают отдельные полоски и кусочки с помощью лупы. Личинок лентеца извлекают.иглой или скальпелем для уточнения диагноза.
Наряду с этим внутренние органы исследуют компрессорным методом. Срезы толщиной 6—8 мм сдавливают до желаемой степени прозрачности между двумя предметными стеклами или в компрессории и просматривают под лупой. У щук плероцеркоиды часто встречаются в половых органах, между икринками и на поверхности яичника. Закончив исследование внутренностей, снимают кожу. Тупой стороной скальпеля осторожно разделяют мышцы на отдельные волокна, помещают их на предметное стекло, покрывают вторым предметным стеклом и исследуют под лупой. Делают и рассечение мышечной ткани на ломтики толщиной 3—4 мм так, чтобы в отдельных участках тела взять все слои мышц от периферии до внутренностей, осматривают их, а затем исследуют компрессионным методом. Описанные плероцеркоиды лентецов — пресноводные формы. Некоторые считают, что проходные рыбы также могут инвазироваться ими и заносить их в море.Известно не менее 10 видов дифиллоботриид, окончательные хозяева которых — морские млекопитающие. Зарегистрировано заражение плероцеркоидами дифиллоботриид лососевых рыб. Плероцеркоиды их сходны с личинками дифиллоботриума из пресноводных рыб (длина их не более 5—10 мм). Дифференциальная диагностика плероцеркоидов и идентификация их со взрослыми формами трудны. У одного из видов морских цестод D.Klebanovskii плеро- церкоид отнесен к типу «F». У тихоокеанских лососевых личинки этого типа встречаются часто [Муратов И.В., 1988]. Bce пресноводные рыбы свободны от этих личинок. Отмеченные плероцеркоиды в желтовато-белых полупрозрачных капсулах, через которые заметны свернутые личинки. Капсулы величиной от 2X4 до 4x6 мм располагаются в глубоких мышцах спины, вблизи позвоночника, чаще в хвостовой, реже — в средней и передней частях тела. Цестода яв- ляется причиной тяжелого заболевания человека. Местное население Дальнего Востока, употребляя сырую, малосоленую и слабомороженную кету, горбушу и другие лососевые, заражается морской формой дифиллоботриид.
Исследование рыб и круглоротых на зараженность личинками скребней рода коринозома (Corynosoma).
Зараженные акантеллами коринозом рыбы и круглоротые (миноги) представляют опасность для плотоядных, свиней, других млекопитающих, человека. Патогенную роль играют разные виды коринозом, но наиболее известны C.strumosum-H C.semerme. Локализация акантелл в рыбах и миногах: икра, молоки, печень, почки, сальник, серозные покровы желудка и кишечника, на плавательном пузыре, под брюшиной, в подреберье, мышцы. Акантеллы коринозом в рыбах инцистирова- ны, грушевидной или дубинковидной формы. Длина акантеллы вида струмозум 3,5 мм. ширина — до 1,3—1,5 мм. Сквозь оболочку при микроскопировании заметны шипы на передней части тела. При помещении в воду личинка реинцистируется: хоботок выходит наружу. Длина таких акантелл от 3 до 4,2 мм. Реинцистированные акантеллы других видов более длинные (до 5—6 мм). Хоботок акантеллы не отличается от такового взрослого скребня. Ha нем 18 продольных рядов крючьев, в каждом ряду еще по 10—12 крючьев. По количеству рядов на хоботке и крючьев на них можно поставить видовой диагноз. Вскрытие и исследование рыб производят обычным способом. Обнаружение акантелл коринозом не представляет трудностей, они легко выявляются невооруженным глазом, а лучше с помощью лупы. Личинки чаще обнаруживают на сальнике, серозной оболочке желудка и кишечника, в икре и молоках рыб.
Исследование морских рыб на зараженность личинками нематод семейства анизакид (Anisakidae). Опасность для здоровья человека, плотоядных и свиней представляют в основном личинки следующих родов: анизакис (Anisakis), терранова (Terranova), контрацекум (Contracaecum). Личинки анизакид встречаются почти во всех морских рыбах. Их также обнаруживают в проходных рыбах и реже в пресноводных.
Рыб исследуют путем обычного вскрытия. Личинки анизакид легко выявляются, крупные, хорошо заметны при осмотре серозных покровов полости тела, внутренних органов и при вскрытии последних.
При воздействии ультрафиолетовым светом личинки ярко люми- несцируют и легко обнаруживаются (особенно в замороженной и оттаенной рыбе).
Диагноз на личинок ставят групповой (анизаки- ды по семейству нематод) или родовой по следующим признакам.Личинки нематод рода анизакис — наиболее распространенные, встречаются почти у всех видов морских рыб. Локализация — полость тела, на серозных покровах внутренних органов, реже внутри и в мускулатуре. Личинки инцистированы, спирально свернуты, в прозрачных цистах. Диаметр цист 3,S—5 мм, толщина — 1—1,5 см. Извлеченная из цисты личинка белой или желтоватой окраски, длина 4 см, толщина — около 1 мм, в передней части заметен желудочек (даже при обычном просмотре). По этому признаку отличают личинок рода анизакис от личинок других анизакид. Личинки длительно сохраняются живыми в рыбах маринованных и слабого посола. Обнаруживают их даже в кальмарах.
Личинки рода терранова — коричневые или красно-коричневые, крупнее личинок анизакисов в 1,5 раза, хорошо замечаются в мышечной ткани рыб, не всегда инцистированы, редко скручены в спи- раль (при осмотре рыбы личинки симулируют кровеносные сосуды).
Личинки рода контрацекум — полупрозрачные, белые или желтоватые, несколько меньше личинок анизакис.
Локализация — внутренние органы, реже мускулатура.
Постмортальное изменение температуры рыбы, выдержка ее в тузлуке и другие факторы стимулируют личинок анизакид к миграции из внутренних органов в мезентерий и мышцы. B мышцах они находят более благоприятные условия для выживания. B связи с этим часто личинок обнаруживают в мускулатуре соленой, мороженой и особенно копченой рыбы. Наибольшую потенциальную опасность представляет сельдь недостаточно соленая и холодного копчения.
Исследование пресноводных рыб на зараженность личинками диоктофимы (Dioctophyma renale) — паразита плотоядных и человека. Щука, окунь, сом, карликовый сомик, жерех, язь, гамбузия, плотва, чехонь, пескарь, быстрянка и другие рыбы — резервуарные хозяева возбудителя. Морфологически Личинка такая же, как и в промежуточном хозяине. Она спиралевидно свернута, инцистирова- на, крупная, заметна невооруженным глазом.
Локализация личинок — мезентерий, нередко они обнаруживаются на стенке желудка и кишечника.Исследование пресноводных рыб на зараженность личинками гна- тостомы (Gnatostoma). Окончательные хозяева гнатостомы — кошка, собака, свинья (локализация — желудок); резервуарные хозяе- ва — рыбы (сазан, уклея, гамбузия и др.). Локализация —,мускулатура. Личинка свернута в цисте, диаметр 1 мм, выделенная из цисты — чуть более 0,5 мм в длину, кутикула исчерчена, передняя часть тела вооружена мелкими шипиками; заметно головное вздутие, покрытое мелкими крючьями, пищевод в виде расширяющейся трубки. Исследуют личинок по описанным выше методикам с компрессией и перевариванием в искусственном желудочном соке.
Человек заражается при поедании не обработанной термически рыбы. При инвазии его личинки мигрируют, оседая в подквбкной клетчатке, легких, брюшной полости, глазах, головном мозге.
Исследование лягушек на зараженность спарганумами спирометры (Spirometra evinacei-europei). Спирометра (гельминт со сложным развитием) — возбудитель зооноза человека — спарганоза. Лягушки (и рептилии) — вторые промежуточные хозяева. B них формируется личиночная форма (спарганум), состоящая из головки, шейки и нечленистой стробилы. Локализация спарганумов в лягушке — мышцы конечностей (чаще мышцы бедра), груди, спины, между петлями кишечника, под капсулой печени. Некоторые спарганумы спутаны в тонких капсулах, другие — свободно расположены в межмышечном пространстве. Спарганумы из лягушек — удлиненной формы (длина от 1,7 до 36 см, ширина 1,2—1,6 мм), молочной окраски. Личинки хорошо заметны при вскрытии. Если спарганумов поместить в теплую воду (3*0—35 0C), то живые личинки расправляются и становятся подвижными.
Исследование ракообразных (Crustacea). C участием ракообразных развиваются возбудители различных гельминтозов человека и животных. Речные раки, полупресноводные крабы и креветки известны как вторые промежуточные хозяева Paragonimus westermani, возбудителя парагонимоза человека, плотоядных и свиней на Дальнем Востоке. Метацеркарии обнаруживаются в речных раках (Cambaroides dauricus, C.scherenckii), в крабах из родов Eriocheir, Potamon и др., креветках Macrobachium pipponesis. Человек, плотоядные и свиньи заражаются при поедании не обработанных термически ракообразных, инвазированных личинками трематоды.
Исследования ракообразных проводят следующими способами (по Г.А.Котельникову, 1991): путем их вскрытия, осмотра с помощью лупы полости тела и компрессорной микроскопии нарезанных кусочков грудных и брюшных мышц, а также жабр и конечностей; путем переваривания ракообразных в искусственном желудочном соке. При микроскопировании целесообразно пользоваться МБС. Метацеркарии в крабах локализуются в мышцах груди, брюшка, в жабрах; в мышцах конечностей — единичные личинки; у речных раков — во внутренних органах, жабрах, мышцах конечностей.
Метацеркарии парагонимуса шаровидной формы, с толстой оболочкой (до 0,02 мм). Обращает на себя внимание громадный центрально расположенный экскреторный пузырь, заполненный сильно преломляющими свет гранулами. B результате этого он выглядит как черное пятно, занимающее почти весь объем цисты. По бокам его проходят изогнутые трубки кишечника. Тегумент личинки по всей поверхности покрыт нежными шипиками. Имеется стилет. Половые железы в виде зачатков "над брюшной присоской. Размер цисты 0,254—0,350 мм, эксцистированная личинка длиной 0,645— 0,735x0,195—0,270 мм; диаметр ротовой присоски 0,075—0,105 мм, брюшной — 0,105—0,135 мм, глотки — 0,030—0,045 мм, диаметр пищевода — 0,045—0,075 мм, стилет — 0,018—0,020 мм.