Биоклиматограмма как метод оценки природных предпосылок для развития и выживаемости яиц геогельминтов в почве
Известно, что развитие и выживаемость яиц аскарид в почве обусловливаются природными факторами. Определяющими из них являются солнечная радиация, температура и влажность почвы.
Для определения сроков развития яиц аскарид предложено использовать формулу Боденгеймера в следующем виде:
r C _ 300 градусо-дней
s" 'f F.......................................................
s"~r ij r'где S — срок развития яиц аскарид (сут) при температуре T; T0 — температура среды при проведении опыта или наблюдения; t0 — нижний температурный порог (13 0C); C — сумма показателей эффективной температуры.
Как показали экспериментальные расчеты, суммировать показатели эффективной температуры целесообразно с того момента, когда среднесуточная температура почвы будет выше 13 0C.
Для ориентировочного определения сроков развития яиц можно пользоваться данными метеорологических станций, где подекадно выводят среднюю температуру почвы. Для развития яиц аскарид до стадии личинки необходимо 300 градусо-дней эффективного теп- ла.
Порядок подсчета необходимой суммы показателей тепла по средней температуре почвы за декаду очень прост. Для этого последовательно берут среднюю температуру декад (от 13 0C и выше) и определяют сумму эффективного тепла за декаду fT — 13 0C) XlO + + (T — 13 0Q X 10 + (Tn — 13 °С) X 10, пока не наберут общую сумму, равную 300 градусо-дней.
C учетом этих данных предложен метод биоклиматограмм, в котором на основании показателей, характеризующих климатические условия в той или иной местности, графически можновыделить периоды развития, сохранения жизнеспособности и гибели яиц аскарид.
Для построения биоклиматограмм используют многолетние среднемесячные или среднедекадные данные температур и влажности почвы. B верхней части биоклиматограммы строят графики годового хода температур и влажности поверхностного слоя почвы- Эта часть биоклиматограммы графически отражает существующие условия внешней среды, в которых развиваются яйца гельминтов.
B этой же части биоклиматограммы наносят горизонтальные линии, характеризующие условия, при которых возможно развитие яиц гельминтов. Нижняя часть биоклиматограммы является результатом сочетанного анализа конкретных условий внешней среды, обозначенных кривыми годового хода температуры и влажности почвы и показателей развития яиц гельминтов до инвазионной стадии. Здесь имеются 4 строки: в первой из них отмечаются периоды возможного развития, сохранения жизнеспособности и гибели яиц гёогельмин- тов в зависимости от температурных условий почвы, во второй — в зависимости от условий влажности. Длительность этих периодов получают при наложении линий, соответствующих условиям развития яиц, на кривые годового хода температур и влажности почвы.Точки пересечения графиков проектируются соответственно нa 1 и 2-ю строки нижней части биоклиматогоаммы R 3 й ^ а "ю зан период развития яин геогеГ. ^ В З'и строке пока-
минтов инвазионной стадии** *"* ДОСТИЖения ™«™» гель-
в термостате. После определения жизнеспособности яиц устанавливают эффективность испытуемого средства. C наиболее эффективными овицидами опыты повторяют на взвеси яиц, выделенных из фекалий инвазированных людей или животных. Установленную жизнеспособность яиц подтверждают биопробой. B случае испытания неполноценных по содержанию активнодействующего вещества (АДВ) препаратов рабочие растворы из них готовят по специальной формуле:
где A — нужное разведение, %; B — концентрация имеющегося раствора, %; C — необходимое количество раствора (мл); X — количество имеющейся жидкости, необходимой для приготовления рабочего раствора, мл.
Перед тем как перейти к дальнейшей апробации выявленных овицидов, необходимо определить их токсичность и коррозионную активность.
Производственные опыты проводят в микроочагах гельминто- зов. Испытуемые соединения необходимо оценить по степени их ови- цидного действия. При этом придерживаются следующей схемы. B 1-й серии опытов следует провести отбор соединений, обладающих сильными, выраженными и слабыми овицидными свойствами — действием (т.е. обладающие высокой, выраженной, средней или слабой эффективностью). K первым относятся соединения, KO- торыев наиболее приемлемых концентрациях вызывают гибель всех яиц; ко вторым — соединения, убивающие свыше 50 % яиц; к третьим — соединения, вызывающие гибель до 50 % яиц. Критерий экспозиции предусматривается в пределах 30 мин. Bo 2-й серии опытов экспозиция увеличивается лишь на 30—60 мин.
B производственных условиях оценку препаратов проводят по результатам дезинвазии помещений. Дезинвазию считают высокоэффективной в том случае, если овицидный эффект (ОЭ) достигает 90—100 %, удовлетворительной, если ОЭ равен 60—90 %, неудовлетворительной, если ОЭ менее 60 %. B данной оценке за основные критерии принимаютдопустимые концентрации препарата и экспозицию в пределах 3 ч.
Лабораторные опыты проводят в нескольких сериях. B первой серии используют деревянные ящики шириной 20 см, длиной 45— 60 см, глубиной 20—30 см. Дно и стенки ящиков имеют отверстия, а внутри они разделены на секции, предназначенные для разных экспозиций испытуемых препаратов. B контроле используют отдельный ящик. Почву (разных видов) помещают в ящике послойно (15, 10, 5, 1 см), закладывают пробы яиц на стадии дробления и отдельно на стадии инвазионной личинки (в каждой пробе не менее 1000 яиц). Взвесь яиц вносят на полоски фильтровальной бумаги и вокруг нее в почву, огражденную проволочным каркасом. Через 1—
3 сут на опытные участки вносят рабочий раствор препарата, а на контрольные — воду. Первоначально испытывают в 3 % растворе препарата при норме расхода 4 л/м2, при экспозиции 1, 3, 5 сут. Затем извлекают заложенные пробы и отмывают их от препарата (не менее 5 раз).
Выделенные из проб яйца культивируют в термостате (24—26 0C). Жизнеспособность их определяют через 15—20 сут общепринятыми методами и на основании этих данных оценивают овицидную эффективность препарата. Опыт повторяют, но уже используя раствор другой концентрации, норму расхода препарата и экспозицию.Следующая серия опытов осуществляется с активными овицида- ми по такой же методике, но в почву при этом закладывают пробы фекалий, насыщенные яйцами гельминтов (извлеченные из концевых отделов маток гельминтов или полученные из фекалий зараженных животных). У наиболее перспективных овицидов определяют токсические и коррозионные свойства.
Полевые и полупроизводственные опыты проводят в условиях, исключающих доступ животных и людей. Составляют схему опы- тов. B первой серии исследования проводят на рыхлой почве, во второй — на твердой, в третьей — на рыхлой и твердой, но после внесения препарата поверхность объекта покрывайт пленкой. Bo всех сериях опытов участок делят на секции в зависимости от экспозиции. Последующая работа проводится так же, как и в лабораторных условиях.
Производственные опыты осуществляют в неблагоприятных по гельминтозам хозяйствах или в микроочагах. Объектами обеззараживания служат места выгула животных, земляной пол, участки ферм, дворов, загрязненные фекалиями животных или людей. Неблагополучие объектов определяют путем исследования поверхностного слоя почвы, фекалий, взятых с поверхности объекта. Составляют план-схему, в которой предусматривают место и количество обрабатываемой площади, концентрацию и норму раехода рабочего раствора препарата, экспозицию, количество проб почвы, которое необходимо взять до и после обработки объекта. Пробы берут с поверхности и с глубины 5, 10 и 15 см (по 4 пробы в каждом случае) и на площади не менее 20X30 см (масса примерно 80—100 г). Эти пробы служат контролем. Рабочие растворы из неполноценных (по содержанию АДВ) препаратов готовят по указанной выше формуле.
Для получения более объективных данных об эффективности препарата на опытных и контрольных участках необходимо производить искусственную закладку проб с яйцами гельминтов. По данным жизнеспособности яиц определяют овицидную эффективность препарата и оценивают качество проведенной дезинвазии.