Определение технической готовности ферментаторов и их монтажных схем к работе в асептических условиях.
Целью проводимых работ является определение возможности ведения процесса культивирования в асептических условиях. Как и в случае с УНС, предварительно проводят индивидуальные испытания и проверку на воде.
Затем проверяют герметичность аппарата вместе с его монтажной схемой. Заключительные испытания можно проводить либо сразу на рабочем режиме (подача воздуха, работа мешалки, прием среды через УНС и др.), либо по этапам с предварительной оценкой стерилизуемости ферментатора, эффективности герметизации, стерильности питательной среды, подаваемой через УНС, а также стерильности аэрирующего воздуха и различных жидких добавок.При поэтапной проверке рабочий режим является фактически заключительным этапом испытаний, по которому и оценивают возможность ведения культивирования в данном аппарате в асептических условиях. Эффективность достижения необходимых условий на каждом из этапов можно оценить по стерильности питательной среды в ферментаторе. Однако этот метод имеет существенный недостаток — требует значительных затрат времени. С учетом подготовительных работ продолжительность одного этапа может достигать 3 сут. При проверке на модельной питательной среде стерилизуемости аппарата, стерильности воздуха, питательной среды и пеногасителя требуется не менее 15 сут на работы, предшествующие созданию рабочего режима, который имитирует процесс аэробного культивирования. На практике, как правило, эти работы длятся не менее месяца.
Поэтому целесообразно применять биологический метод проверки по питательной среде только на заключительном этапе испытания — на рабочем режиме, поскольку достижение требований, обеспечивающих поддержание в аппарате асептических условий, может быть проверено поэлементно иными методами. Например, стерилизуемость можно оценить путем анализа конструктивных узлов аппаратов и их монтажных схем, а эффективность герметизации — с помощью галоидного течеискателя.
Задерживающую способность фильтров, предназначенных для стерилизации воздуха, можно оценить по бактериальному аэрозолю, например Bact. prodigiosum, или по физическим аэрозолям [60, 61]. Таким образом, схема оценки ферментаторов с применением индикаторной питательной среды может быть упрощена, но при условии самой тщательной подготовки и проведения каждого этапа испытаний. Работу по подготовке УНС, фильтров и самого ферментатора можно проводить одновременно. Момент выдачи стерильной пита-тельной среды совмещают с приемом ее в стерильный ферментатор, в котором поддерживают давление 0,12— 0,15 МПа. Поскольку стерильность питательной среды, загружаемой через УНС, не является еще доказанной, то в первом опыте проводят повторную тепловую обработку и охлаждение среды. Затем включают мешалку и подают в аппарат воздух, расход которого соответствует интенсивности аэрации, применяемой при получении целевого продукта данного микробиологического производства.
Пробы питательной среды отбирают из ферментатора через 2—2'/г сут, поскольку обычно за это время ■единичные клетки, попавшие в аппарат, образуют популяцию, концентрация которой достаточна для определения загрязнений микробиологическими методами.
12.