ОПРЕДЕЛЕНИЕ АСКОРБИНОВОЙ И ДЕГИДРОАСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТ
(по Дж. Божику)
Определение общего содержания аскорбиновой и дегидроаскорбиновой кислот
Отбирают пипеткой 5 или 10 см3 вытяжки, в которой определена аскорбиновая кислота (по вышеописанному способу), в коническую колбу на 50 см3, туда же добавляют 3,5 см3 1 н.
раствора серной кислоты и после перемешивания - 1,75 см3 1 М раствора Na2SO4.После нового перемешивания закрывают колбочку резиновой пробкой и оставляют на 10 минут. Через 10 минут добавляют в ту же колбу 2,5 см3 1 М раствора хлорной ртути и 5,75 см3 воды (11,5 см3 в случае, если взято 5 см3 вытяжки). После перемешивания образовавшийся осадок отфильтровывают. Фильтрат бесцветный, а если вытяжка была окрашена, она частично обесцвечивается. Затем к 5 или 10 см3 фильтрата прибавляют соответственно 10 или 20 см3 воды и титруют раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола. Вычисляют содержание аскорбиновой кислоты, как указано ниже. Полученные результаты представляют общее содержание аскорбиновой и дегидроаскорбиновой кислот. По разности между этим количеством и содержанием аскорбиновой кислоты узнают содержание дегидроаскорбиновой кислоты в пробе.
Для определения аскорбиновой кислоты в колбы на 50 см3 берут по 5-10 см3 вытяжки, приготовленной для определения аскорбиновой кислоты, и последовательно прибавляют следующие реактивы: 3,5 см3 1 н. раствора серной кислоты, 2,5 см3 раствора уксуснокислого свинца и 5 см3 воды (или 10 см3, если взято 5 см3 вытяжки). После добавления каждого раствора содержимое колбы перемешивают вращением. Под конец выпадает осадок (он сероватый, тянущийся, что обусловлено присутствием высокомолекулярных веществ). Содержимое колбы интенсивно перемешивают вращением в течение 10 секунд, а затем добавляют 2,5 см3 95%-ного этилового спирта. Реакционную смесь опять перемешивают, фильтруют через бумажный фильтр, отбирают 5 или 10 см3 фильтрата и титруют 2,6-дихлор- фенолиндофенолом.
Для вычисления аскорбиновой кислоты с учетом разведений применяется следующая формула:
где: а - количество куб. см краски, которое пошло на титрование пробы (об4);
Т - титр краски;
обі - первоначальный объем вытяжки, полученной из навески;
062 - часть вытяжки, взятой для дальнейшего определения;
063 - объем, полученный в результате обработки части первоначальной
вытяжки;
064 - объем вытяжки, взятой на титрование краской; н - навеска.