БЫСТРОЕ КОЛОРИМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИТРАТОВ (по Д. Катальдо и др.)
Определение нитратов в растительных тканях титрованием салициловой кислотой [1] можно вести в высушенном и сыром материале. В первом случае материал фиксируется острым паром в течение 5 минут и досушивается до постоянного веса при t = 70° С .
Высушенный образец измельчается, берется навеска в 50 или 100 мг, заливается деионизованной водой - 5 или 10 мл соответственно.При определении нитратов в сыром материале берется навеска 1 г и 6 мл воды или фосфатного буфера. Гомогенат фильтруется, и фильтрат центрифугируется при 3000g 15 минут. Супернатант сливается и используется для анализа.
В анализе используется деионизованная вода - вода, освобожденная от ионов и катионов. Дистиллят можно брать в том случае, если он свободен от нитратов. В противном случае его нужно пропустить через катионит, чтобы освободиться от нитратов и нитритов.
Суспензия инкубируется при 45°С 1 час при постоянном встряхивании, далее центрифугируется (5000g, 15 мин). Супернатант декатируется и используется для анализа. В колбу Эрленмеера на 50 мл заливается 0,2 мл центрифугата и 0,8 мл 5%-ного раствора салициловой кислоты, приготовленной на концентрированной серной кислоте ( использовать серную кислоту марки ХЧ, в темной склянке раствор может храниться в течение 1 недели).
Через 20 минут при комнатной температуре в колбу медленно тонкой струей приливается из бюретки 19 мл 2 и. NaOH. Содержимое колбочки при этом нужно постоянно перемешивать. При наличии в образце нитратов появляется стойкое желтое окрашивание, стабильное на протяжении 48 часов. Раствор охладить и фотометрировать при 410 нм.
В качестве контроля используется образец, приготовленный так же, как опытный, только вместо фильтрата в него вносится 0,2 мл воды.
Калибровочный график для определения нитратов строится по KNO3. KNO3 гидроскопичен, поэтому перед взятием навески его нужно высушить в термостате до постоянного веса. При приготовлении серии растворов с разной концентрацией KNO3 (5 мкг/мл - 55 мкг /мл) для построения калибровочного графика нужно брать их в объеме не более 0,2 мл, если же объем меньше 0,2 мл, то его нужно доводить водой до 0,2 мл.
Определение нитратов можно вести в присутствии ионов хлора (до 2%), аммония и нитритов.
Литература
1. Cataldo D.A., Haroon М., Schrader L.E., and Youngs V.L. Rapid colorimetric determination of nitrate in plant tissue by titration of salicylic acid// Commun. Soil Science and plant analysis. 1975. V. 6(1). P.71 - 80.