Микроклональное размножение растений

В работе руководствовались общепринятыми методами культивирования in vitro изолированных органов растений (Бутенко, 1964).

Микроклональное размножение проводили путем снятия апекального доминирования и активации пазушных почек при добавлении в питательную среду цитокининов.

Исходным материалом для микроразмножения служили микрочеренки, содержавшие небольшую часть стебля и пазушную почку, лист при этом удаляли. Черенки высаживали в стеклянные пробирки объемом 50 мл на питательную среду Мурасиге-Скуга (MC) (10 мл) с добавлением цитокинина (6-бензиламинопурин, 1 мг/л).

Коэффициент микроразмножения (KMP) каждого сорта определяли как среднее количество хорошо развитых побегов, полученных при клональном размножении от одного экспланта. Этот параметр позволяет оценивать способность к размножению сортов в условиях in vitro.

Сформировавшиеся микропобеги отделяли и пересаживали на питательную среду MC с половинным составом макро- и микроэлементов, дополненную ауксином (ИУК, 0,4 мг/л) для их дальнейшего роста и укоренения. Когда через 3—4 недели микрорастения достигали высоты 30-40 мм, их пересаживали в стеклянные пробирки, содержащие по 10 мл питательной среды MC с половинным составом макро- и микроэлементов без фитогормонов (1/2 MC). На рисунке 1 представлена схема подготовки различных сортов ежевики, малины и земляники для длительного хранения.

Рис. 1. Последовательность использования питательных сред при подготовке образцов ежевики, малины и земляники для длительного хранения

На всех этапах работы микрорастения культивировали при фотопериоде длинного дня (16 ч. освещения и 8 ч. темноты, интенсивность освещения 2000 лк) и температуре 22^oC на свету и 18^oC в темноте.

2.2.2.