Клональное микроразмножение растений
Основным методом поддержания in vitro коллекций является клональное микроразмножение, позволяющее в короткие сроки получить большое число идентичных исходному сорту микрорастений для длительного хранения in vitro.
Пробирочные растения хранятся в цикле последовательных этапов: клонального микроразмножения и беспересадочного in vitro хранения в условиях минимального роста микрорастений. На первом этапе работы анализировали особенности микроклонального размножения разных сортов ежевики, малины и земляники. На рисунке 2 представлены микрочеренки ежевики (рис. 2, а), малины (рис. 2, б) и земляники (рис. 2, в), посаженные на питательную среду Мурасиге и Скуга, дополненную цитокинином (1 мг/л БАЛ) для активации пазушных почек и образования боковых побегов, из которых в дальнейшем были получены выровненные микрорастения для длительного хранения in vitro (рис. 3-4). Оценка коэффициента микроразмножения (KMP) показала, что у изученных сортов земляники значения KMP почти вдвое превышают соответствующие показатели сортов ежевики и малины (табл. ІГ). В пределах каждой культуры (ежевика, малина и земляника) сорта значительно различались по способности к микроразмножеиию. Так, среди изученных сортов ежевики наиболее высоким KMP обладал сорт Silvan (3,4 ± 0,5), а наиболее низким KMP - сорт Агавам (1,7 ± 0,1). Среди сортов малины наиболее высокие значения выявлены для сортов Mandarin (3,7 ± 0,3), наиболее низкие - у сорта Красноплодный Сеянец (1,5 ± 0,1). Среди изученных сортов земляники сорт Polka имел наиболее высокие значения KMP (5,8 ÷ 0,8), а сорт Red Gauntlet - наиболее низкие (3,8 ± 0,5) (табл. 77).
с 1 мг/л БАЛ
Рис. 2. Микрочеренки ежевики (а), малины (б) и земляники (в) на среде MS
а б в
Рис.
3. Микропобеги ежевики (а), малины (б) и земляники (в) на среде MS с
а б в
Рис. 4. Укорененные микрорастения ежевики (а), малины (б) и земляники (в) (перед
закладкой на длительное низкотемпературное хранение)
Таблица II. Эффективность размножения микрорастений ежевики,
малины и земляники в культуре in vitro
| Название культуры | Название сорта | Количество посаженных микрочеренков | Количество микропобегов, выросших через 6 недель | Коэффициент микроразмножения (KMP) |
| Ежевика (Rubus = Eubatus Focke) | Whitford Thomless | 198 | 429 | 2,2 ± 0,2 |
| Merton Thomless | 192 | 381 | 2,0 ± 0,2 | |
| Silvan | 348 | 1183 | 3,4 ± 0,2 | |
| Bodega Bay | 215 | 499 | 2,3 ± 0,2 | |
| Агавам | 266 | 440 | 1,7 ±0,1 | |
| Среднее значение KMP | 2,8 ± 0,2 | |||
| HCP0, os* | 0,6 | |||
| Малина (Idaeobatus Focke) | Mandarin | 382 | 1418 | 3,7 ± 0,3 |
| Canby | 170 | 385 | 2,3 ± 0,3 | |
| Rubin Bulgarski | 225 | 562 | 2,5 ± 0,2 | |
| Ранняя Сладкая | 251 | 556 | 2,2 ± 0,2 | |
| Красноплодный Сеянец | 183 | 279 | 1,5 ±0,1 | |
| Среднее значение KMP | 2,4 ± 0,2 | |||
| HCP0,os | 0,7 | |||
| Земляника (Fragaria ananassa Duch.) | Red Gauntlet | 223 | 846 | 3,8 ±0,5 |
| Polka | 208 | 1206 | 5,8 ± 0,8 | |
| Venta | 218 | 1160 | 5,3 ± 0,7 | |
| Holiday | 174 | 849 | 4,9 ± 0,7 | |
| Боровицкая | 218 | 1117 | 5,1 ±0,6 | |
| Среднее значение KMP | 5,0 ± 0,7 | |||
| HCP0i05 | 0,6 | |||
* HCPo,os- Наименьшая существенная разность при р - 0,05
3.1.2.