Авторизация
Авторизируйтесь
X
  • Email*
  • Пароль *
или зарегистрируйтесь
Регистрация
X
  • Email*
  • Пароль
    (6-15 символов)
    *
  • Подтвердите пароль *
Сообщение администратору
X

Технология переработки восковой моли, изучение противотуберкулезных свойств хитозана и взаимодействия с липолитическими ферментами

 

Останина Екатерина Сергеевна

Технология переработки восковой моли, изучение противотуберкулезных свойств хитозана и взаимодействия с липолитическими ферментами

Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук. Щёлково - 2007

Диссертация | 2007 | Россия | docx/pdf | 6.39 Мб

Для получения возможности доступа к источнику авторизируйтесь или зарегистрируйтесь.

Специальность 03.00.23 - биотехнология
Одним из важнейших достижений мирового биотехнологического прогресса в области изыскания новых перспективных веществ за последние годы стало получение, изучение и внедрение в практику биополимеров хитина, хитозана и их производных. Уникальная структура хитозана обуславливают проявление целого ряда привлекательных свойств этого поликатиона, основными из которых являются - гипоаллергенность, биодеградируемость, биосовместимость, а также широкие антимикробные свойства.
Актуальность темы. На сегодняшний день основными источниками для получения хитина и хитозана являются панцири ракообразных (крабы, креветки, криль). Технология переработки включает постадийное удаление сопутствующих веществ с использованием химических и ферментативных способов обработки. Расширение областей применения данных биополимеров обуславливает поиск новых перспективных источников хитина. Как известно, в покровах насекомых до 50% занимает полимер хитин, наряду с белками придающий прочность экзоскелету. Таким образом, кутикулу насекомых можно рассматривать как источник различных биологически активных веществ, в том числе и хитина, с возможностью выделения в отдельном виде или в виде комплексов. Благодаря традиционно развитому пчеловодству в нашей стране в качестве источника биологически активных веществ можно предложить кутикулу личинок восковой моли - Galleria mellonella L, в большом количестве паразитирующих в пчелиных ульях.
Принимая во внимание уникальные свойства хитина и хитозана, в последние годы значительно возросло изучение этих природных полимеров. На сегодняшний день известно более 200 областей применения 
хитина и хитозана, в том числе и в медицине. Нарушение липидного метаболизма в организме человека может привести к развитию таких заболеваний как атеросклероз, диабет, ожирение и др. Это определило интерес к изучению молекулярного механизма действия липолитических ферментов и поиску соединений, влияющих на липидный обмен. Хитозан благодаря уникальной структуре и положительному заряду является полифункциональным соединением, обладающим целым рядом уникальных свойств: высокой совместимостью с животными тканями,
биодеградируемостью, отсутствием токсичности и др. что открывает перспективы его использования в качестве ингибитора липолитических ферментов.
По данным многих исследователей хитозан обладает антимикробным эффектом в отношении многих патогенных микроорганизмов. Однако данных о чувствительности к хитозану возбудителей туберкулеза на сегодняшний день нет. Изучение противотуберкулезных свойств ферментативно полученных препаратов с низкой молекулярной массой и сравнение их с действием высокомолекулярных хитозанов на клетках микобактерий позволит провести сравнительный анализ и сделать некоторые обобщения практического характера связанного с использованием хитозана в медицине и ветеринарии для борьбы с туберкулезом.
Целью настоящей работы разработка биотехнологической схемы переработки личинок восковой моли с получением таких биологически активных веществ, как экстракт, хитин-меланиновой комплекс и хитозан. Изучение противотуберкулезных свойств хитозана и его взаимодействия с липолитическими ферментами.

Содержание

ВВЕДЕНИЕ
Список используемых сокращений
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Природные полисахариды хитин и хитозан: строение,
физико-химические свойства
1.2. Области применения
1.3. Основные источники хитина и хитозана
1.3.1. Ракообразные {Crustacea)
1.3.2. Грибы {Fungi)
1.3.3. Насекомые {Insecta)
1.3.4. Нетрадиционные источники
1.4. Получение хитина и хитозана из насекомых
1.5. Антимикробные пептиды насекомых
1.5.1. Перспективы применения антимикобных пептидов
насекомых
1.5.2. «Липазная концепция» лечения туберкулеза
1.6. Антибактериальная активность хитозана
1.7. Липолитические ферменты
1.7.1. Области применения липолитических ферментов
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Материалы и методы
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Получение хитина и низкомолекулярного хитозана из
кутикулы восковой моли Galleria mellonella L
3.1.1. Депротеинирование
3.1.2. Обесцвечивание
3.1.3. Деацетилирование
3.1.4. Ферментативный гидролиз
3.2. Изучение противотуберкулезных свойств хитозана  
3.2.1. Подбор концентрации хитозана 90
3.2.2. Изучение зависимости гибели клеток М. smegmatis от
Мр хитозана 91
3.2.3. Изучение зависимости гибели клеток М. smegmatis от
времени взаимодействия с хитозаном 92
3.2.4. Определение прочности связывания хитозана с
клетками М. smegmatis 93
3.2.5. Определение МИК хитозана 94
3.2.6. Изучение антибактериальных свойств производных
хитозана 95
3.2.7. Противотуберкулезная активность хитозана 95
3.3. Изучение свойств экстракта выделенного из восковой моли
Galleria mellonella 98
3.3.1. Изучение зависимости гибели клеток М. smegmatis от
времени взаимодействия с экстрактом 98
3.3.2. Фракционирование экстракта выделенного из восковой
моли 99
3.4. Изучение взаимодействия хитозана с липолитическими
ферментами 103
3.4.1. Ингибирование активности липолитических ферментов
хитозаном в гомогенных водных растворах 104
3.4.2. Ингибирование активности липолитических ферментов хитозаном в гетерогенных растворах, на границе раздела фаз 111
ВЫВОДЫ 116
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 117
ПРИЛОЖЕНИЕ 141 

Диссертация | 2007 | Россия | docx/pdf | 6.39 Мб

Для получения возможности доступа к источнику авторизируйтесь или зарегистрируйтесь.

Технология переработки восковой моли, изучение противотуберкулезных свойств хитозана и взаимодействия с липолитическими ферментами

релевантные научные источники:

Другие источники по дисциплине Биотехнология:

  1. Биохимические особенности использования иммобилизованных дрожжей в производстве игристых вин бутылочным способом
    Согоян Каринэ Рудольфовна | Диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук. Ялта - 1998 | Диссертация | 1998 | Украина | docx/pdf | 9.5 Мб